Historia
La sede del museo se halla en la Puerta de San Sebastián de las Murallas Aurelianas y ofrece a los visitantes un itinerario didáctico desde 1990, aunque el monumento hubiera sido destinado a usos poco acordes a su importancia desde tiempos muy anteriores. En 1939, a pesar de la opinión contraria de la Ripartizione Antichità e Belle Arti, opuesta a la transformación en estudio artístico de un monumento que estaba abierto al público desde hacía años, se realizaron algunas reformas en las salas interiores de la Puerta para convertirlas en la vivienda y el estudio privado del secretario del partido fascista, Ettore Muti, entre 1941 y 1943.
Se construyeron nuevos entarimados para sustituir las bóvedas de piedra que habían cedido y se reconstruyeron los pavimentos de travertino y ladrillo que se embellecieron con dos mosaicos en la primera planta. Puerta de San Sebastián
Tras la Segunda Guerra Mundial, la Puerta fue reabierta al público por parte del alcalde de Roma, que inauguraba así el proyecto de realización de un museo de las murallas. Pero, con el paso de los años, una parte de las estancias de la Puerta fue convertida en vivienda del portero y su familia. El resto de las salas fue cedido en 1960 al Ministerio della Publica Istruzione, Direzione Generale alle Antichitè e Belle Arti, para que instalara allí una oficina especial de la Appia Antica y, más tarde, un museo de la vía Appia. Para ello se realizaron otras reformas que afectaron algunos lienzos de muralla, pero la susodicha oficina jamás funcionó.
La administración municipal recuperó la posesión del monumento en 1970. Al año siguiente, el servicio Ripartizione Antichità e Belle Arti abrió el modesto Museo delle Mura uniéndolo con el tramo de camino de ronda abierto hasta la via C. Colombo. El horario de apertura se restringió al domingo y, unos años después, se decidió volver a cerrarlo. Hubo que esperar hasta 1984 para ver la reapertura y la distribución definitivas con motivo de la exposición «Roma subterránea». En 1989, se instituyó oficialmente el Museo delle Mura di Roma tras una asamblea municipal, conforme a la Ley Regional de 1975. El año siguiente se inauguró el actual recorrido didáctico.